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Registro Completo |
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Biblioteca(s): |
Embrapa Mandioca e Fruticultura. |
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Data corrente: |
10/04/1992 |
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Data da última atualização: |
10/04/1992 |
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Autoria: |
SOUZA JUNIOR, M. T. |
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Afiliação: |
Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuaria. Centro Nacional de Pesquisa de Mandioca e Fruticultura. |
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Título: |
Uso de un cDNA de gama-zeina marcado com biotina na caracterizacao de genotipos de milho (Zea mays L.) |
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Ano de publicação: |
1991 |
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Fonte/Imprenta: |
Lavras, MG: Escola Superior de Agricultura de Lavras, 1991 |
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Páginas: |
85 p. |
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Idioma: |
Português |
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Conteúdo: |
Buscou-se viabilizar o uso do fragmento ZM5, um dsDNA de aproximadamente 900pb obtido a partir do mRNA de gama-zeina (27KD), como sonda marcada com biotina na caracterizacao de genotipos de milho que apresentavam distintos teores desta proteina. Para tanto avaliou-se a utilizacao de dois tipos de marcacao, "Nick-translation" e Polimerizacao da fita sense do bacteriofago M13mp18 trazendo o ZM5 inserido; alem de tres tipos de nucleotideos marcados: Biotina-7-dATP, Biotina-14-dATP e Biotina-11-dUTP. Tendo em vista a necessidade de utilizacao de um protocolo de isolamento e purificacao de DNA genomico de milho que fosse simples, rapido, barato, e que produzisse DNA de alto peso molecular em quantidade e com alto grau de pureza, foram avaliados 5 protocolos de isolamento. Procedeu-se tambem a realizacao de "Southern-blot" com DNA de estirpes de Rhizobium sp. sendo utilizados como DNA alvo, e o fragmento de DNA PCQ15 (4Kb) marcado via "Nick-translation". Observou-se que a utilizacao de fragmentos com 4Kb ou mais, marcados com Biotina-14-dATP ou Biotina-11-dUTP via "Nick-translation" permitia, seguindo o material e metodos descrito, detectar copias unicas de fragmentos no DNA genomico dos materiais. Fragmentos, com 1Kb ou menos, so permitia deteccao de copia unica quando inserido no bacteriofago M13 e marcado com com Biotina-11-dUTP. A maior limitacao do presente trabalho foi obter um protocolo de isolamento e purificacao que viesse a satisfazer todas as caracteristicas inicialmente desejadas. MenosBuscou-se viabilizar o uso do fragmento ZM5, um dsDNA de aproximadamente 900pb obtido a partir do mRNA de gama-zeina (27KD), como sonda marcada com biotina na caracterizacao de genotipos de milho que apresentavam distintos teores desta proteina. Para tanto avaliou-se a utilizacao de dois tipos de marcacao, "Nick-translation" e Polimerizacao da fita sense do bacteriofago M13mp18 trazendo o ZM5 inserido; alem de tres tipos de nucleotideos marcados: Biotina-7-dATP, Biotina-14-dATP e Biotina-11-dUTP. Tendo em vista a necessidade de utilizacao de um protocolo de isolamento e purificacao de DNA genomico de milho que fosse simples, rapido, barato, e que produzisse DNA de alto peso molecular em quantidade e com alto grau de pureza, foram avaliados 5 protocolos de isolamento. Procedeu-se tambem a realizacao de "Southern-blot" com DNA de estirpes de Rhizobium sp. sendo utilizados como DNA alvo, e o fragmento de DNA PCQ15 (4Kb) marcado via "Nick-translation". Observou-se que a utilizacao de fragmentos com 4Kb ou mais, marcados com Biotina-14-dATP ou Biotina-11-dUTP via "Nick-translation" permitia, seguindo o material e metodos descrito, detectar copias unicas de fragmentos no DNA genomico dos materiais. Fragmentos, com 1Kb ou menos, so permitia deteccao de copia unica quando inserido no bacteriofago M13 e marcado com com Biotina-11-dUTP. A maior limitacao do presente trabalho foi obter um protocolo de isolamento e purificacao que viesse a satisfazer todas as caracteristicas inicialmen... Mostrar Tudo |
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Categoria do assunto: |
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Registro original: |
Embrapa Mandioca e Fruticultura (CNPMF) |
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| Registros recuperados : 217 | |
| 13. |  | CAPDEVILLE, G. de; SOUZA JUNIOR, M. T.; PAVIN, M. E. Identificação e caracterização molecular de dois genes de Beta-1,3 glucanases em Carica papaya. Fitopatologia Brasileira, v. 31, suppl., ago. 2006. Anais do: CONGRESSO BRASILEIRO DE FITOPATOLOGIA, 39.; ANNUAL MEETING OF THE BRAZILIAN PHYTOPATHOLOGICAL SOCIETY, 39., 2006, Salvador, BA. p. S327.| Biblioteca(s): Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. |
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| Registros recuperados : 217 | |
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